طرق استخلاص النيماتودا


طرق استخلاص النيماتودا تشمل الطرق العملية والمعملية لاستخلاص النيماتودا من التربة والاجزاء النباتية وتشمل عدة مراحل طرق جمع العينات - طرق استخلاص النيماتودا من عينات التربة - طرق استخلاص النيماتودا من الاجزاء النباتية


طرق جمع العينات 

1- طرق جمع العينات من التربة 

تجمع عينة من التربة اما بواسطة اسطوانة جمع العينات من اعماق مختلفة او بواسطة جاروف حيث يجمع كل عمق على حدة وعموما فوزن العينة من 100-250 جرام تربة اما عدد العينات فيتوقف على مساحة الارض المطلوب حصر الانواع الموجودة فيها 


فى حالة المساحة الكبيرة يتم خلط العينات من جميع المناطق لتصبح عينة مركبة يؤخذ منها للفحص المعملى 

وفى حالة عينات التربة المأخوذة من حقل مزروع فالعمق الماخوذ منة يجب ان يتناسب مع وجود جذور هذة النباتات وخاصة الجذور الرفيعة الشعرية على عمق 30 سم على الاقل وفى حالة الشجيرات والاشجار يزداد العمق حسب نوع الاشجار والعمر وتواجد الجذور الشعرية المغذية 

2- طريقة جمع العينات 

تجمع العينات من جذور النباتات الضعيفة والتى تبدو عليها الاصابة ويفضل اقتلاع النبات برفق حتى لاتتمزق الجذور الشعرية الرفيعة ويجب ان تجمع عينات التربة العالقة بالجذور وكذلك بالنسبة للاجزاء الاخرى مثل السوق والاوراق والابصال حيث توضع فى اكياس نايلون لحين وصولها المعمل وتحفظ بالثلاجة لحين استخلاص النيماتودا منها ويجب ان تدعم العينات بجميع البيانات مثل الموقع وتاريخ اخذ العينة ونوع التربة ونوع المحصول واى بيانات اخرى مصاحبة للنباتات المصابة مع ملاحظة ان النيماتودا متطفلة اجباريا وتحتاج الى انسجة حية للتغذية عليها 


اولا: طرق استخلاص النيماتودا من عينات التربة 

وتتوقف هذه الطريقة على نوع وحجم العينة 

أ- طرق استخلاص النيماتودا من عينات التربة الصغيرة 

1- طريقة الفحص المباشر 

تجرى هذه الطريقة بوضع عينة التربة فى طبق بترى مع قليل من الماء ويجرى فحص مجهرى للكشف عن النيماتودا المتطفلة فى وقت قصير 

2- طريقة قمع برمان 

تنقع عينة التربة مع قليل من الماء ثم تنقل الى قمع برمان (قمع زجاجى توضع فوقة شبكة من السلك موضوع عليها قطعة من القماش الشاش ويركب بساق القمع قطعة من المطاط مع مشبك وتترك العينة للمدة يوم الى يومين فى المعمل تستقبل محتويات ساق القمع فى طبق بترى ثم الفحص المعملى 

ب‌- - طريقة استخلاص النيماتودا من عينات التربة الكبيرة 

1- طريقة المصافى 

تستعمل فى هذه الطريقة مجموعة من المصافى تختلف عن بعضها فى عدد الثقوب فى البوصة الطولية mesh وتستعمل لذلك مصفاة 325 و 60 mesh حيث توضع العينة 250 جم مع كمية من الماء مع التقليب وتوضع فوق مجموعة من المصافى السابقة مع مرور تيار من الماء حتى يتم غسل العينة ثم ينقل ناتج المصفاة فى طبق بترى للمعمل 

2- طريقة الحمع بين المصافى وقمع برمان 

ينقل ناتج الطريقة السابقة من العينة الى قمع برمان وتترك لمدة 24-48 ساعة فى المعمل ثم تجمع محتويات ساق القمع فى طبق بترى للفحص المعملى باستخدام الميكروسكوب 


3- طريقة الطرد المركزى 

تعتبر من الطرق السريعة لاستخلاص النيماتودا من التربة الا انها تسبب تلفا لبعض الانواع ويتم بنقل ناتج العينة من طريقة المصافى 100 جم تربة الى انابيب الجهاز والتشغيل لمدة 4 دقائق (3000 لفة / دقيقة ) – يصب الماء الزائد من الانابيب ثم تملا بمحلول سكرى (484.5جم /لتر ماء ) – التشغيل لمدة دقيقة وتنقل المحتويات الى المصفاة 325 mesh ثم الغسيل بالماء – تنقل محتويات المصفاة فى كاس ثم الفحص المعملى باستخدام الميكروسكوب 

ثانيا : استخلاص النيماتودا من الاجزاء النباتية 

1- طريقة تمزيق الانسجة النباتية 

يتم تقطيع الاجزاء النباتية المصابة الى قطع صغيرة فى طبق بترى مع قليل من الماء وتعتمد هذه الطريقة على خروج النيماتودا المتطفلة من الانسجة النباتية المصابة الى الخارج عند التمزيق 

2- طريقة النقع 

تقطع الاجزاء النباتية المصابة الى قطع صغيرة فى طبق بترى مع قليل من الماء يكفى لتشبع الجو بالرطوبة ويزود بورق ترشيح مبلل وتحفظ فى درجة 30 درجة مئوية لنشاط النيماتودا وتترك 24 ساعة 

تؤخذ كمية الماء المحتوية على النيماتودا للفحص الميكروسكوبى وتعتمد هذه الطريقة على خروج النيماتودا المتطفلة الداخلية المتحركة من الانسجة المصابة عند تهيئة الظروف 

3- طريقة الحضانة 

توضع الاجزاء النباتية المصابة فى دورق زجاجى مع قليل من الماء وتترك فى مكان دافئ لمدة 3 ايام تنشط خلالها النيماتودا الداخلية المتحركة الى الخارج تؤخذ كمية الماء المحتوية على النيماتودا وتوضع على مجموعة المصافى 60 و 325 mesh مع الغسيل بالماء ثم تنقل محتويات المصفاة الاخيرة الى طبق بترى للفحص الميكروسكويى 

4- طريقة الخلاط 

تقطع الاجزاء النباتية المصابة الى قطع صغيرة فى الخلاط مع قليل من الماء – يدار الجهاز لمدة دقيقة – ينقل المعلق الى مصفاة 60 و325 mesh - تغسل محتويات المصفاة الاخيرة وينقل كمية الى طبق بترى للفحص الميكروسكوبى

Printfriendly